Пробу и меченыйхлорамфениколомконъюгатпероксидазы добавляют в лунки для микротитрования, предварительно покрытые очищенным антителом, специфичным к хлорамфениколу.

Хлорамфеникол в образце связывается с лунками, покрытыми антителом к хлорамфениколу и, следовательно, образуются соединения (антигеном). (антитело). (антиген .пероксидаза).

После промывания добавляют однокомпонентный субстрат для образования окрашенного комплекса. Интенсивность цвета, которая может развиваться впоследствии, обратно пропорциональна количеству присутствующего в пробехлорамфеникола. Затем реакцию останавливают путем добавления стопраствора, а полученную интенсивность цвета можно считывать спектрофотометрически при длине волны 450 нм (контрольная длина волны 630 нм).